레시티나제 시험-목표,원리,절차 및 결과

생물학 교육 비디오

2021 년 2 월 4 일 사가르 아리얄

레시티나제 시험의 목적

목적은 효소 레시티나제를 생산하는 미생물의 능력을 결정하고 레시티나제 효소를 생성 할 수있는 박테리아를 확인하는 것이다.

레시티나제 검사의 원리

레시티나제 또는 포스포리파제는 동물 조직을 파괴하고 병원성에 역할을 할 수있는 능력을 가진 박테리아에 의해 방출되는 효소입니다. 레시티나제는 인지질 레시틴을 분해하는 효소입니다. 인지질 복합체는 일반적으로 조직,혈청 및 난황에서 발생하는 유화제입니다. 레시틴은 달걀 노른자의 정상적인 구성 요소입니다. 레시티나제 활성은 여러 그람 양성균과 그람 음성균을 특성화하는 데 사용됩니다. 세균성 레시티나제는 불용해성 디글리세라이드에 이 레시틴을 난황 한천 배지에 재배될 때 식민지를 포위하는 불투명한 달무리의 결과로 나눕니다.

난황 한천은 레시티나제 및 리파아제 생산 및 단백질 분해 활성에 기초한 상이한 종의 분리 및 추정 분화에 사용되는 차등 및 농축 배지이다. 난황 한천에서,지단백질 성분 레시토비텔린은 또한 레시티나아제에 의해 포스포릴콜린 및 불용성 디글리세라이드로 분할될 수 있으며,이는 배지에 침전물이 형성된다. 이 침전물은 레시티나아제 효소를 생산하는 식민지를 둘러싼 흰색 후광으로 발생합니다. 생성 된 유백색은 자유 지방의 방출 때문입니다.

참고:

바실러스 세레 우스,호기성 포자 생산자는 강력한 레시티나제 양성 유기체이며,만니톨-달걀 노른자-폴리 믹신(미피)한천 플레이트를 사용하여 확인할 수 있습니다. 세레 우스는 일반적으로 만니톨 음성이며,콜로니 주위에 침전물이있는 한천에서 분홍색-적색 콜로니를 생성하여 레시티나제 양성 활성을 나타냅니다. 클로스 트리 디움 퍼프링겐을 확인하고 다른 클로스 트리 디아 종과 구별하기 위해 달걀 노른자 한천이 사용됩니다. 그것은 농축,비 선택적 및 차동 매체이며,또한 클로스 트리 디움 퍼프린 겐스의 추정 식별을위한 나글러 테스트에 사용됩니다. 그것은 무산소,감소된 국가에서 의무 혐기성 세균을 손상하고 더 까다로운 종의 성장을 금할 유독한 산화한 부산물의 대형을 방지하기 위하여 포장됩니다. 긍정적인 레시티나제 시험은 식민지를 포위하는 매체로 늘이는 백색,불투명한,산만한 지역의 외관이 특징입니다.

레시티나제 시험에 사용되는 매체

달걀 노른자 한천 매체

카제인의 췌장 다이제스트
2018 년 11 월 1 일
염화 나트륨 5.0 그램
대두박의 파파인 다이제스트
효모 추출물 5.0
0.4 그램
헤민 5.0 밀리그램
계란 노른자 유화액 100.0 미리리터
한천 20.0 그램

최종 산도 7.0 +/- 0.3 25 에서 25.

레시티나제 시험 절차

  1. 시험 유기체의 루프를 가지고 접시에 직선으로 행진.
  2. 질주 직후 가스박 병에서 혐기성으로 배양하고,혐기성균에 대해 35-37 도 씨에서 24-48 시간 동안 유지된 배양기로 옮기고,호기성균에 대해 35-37 도 씨에서 24-48 시간 동안 플레이트를 배양한다.
  3. 접종체를 둘러싼 유백색 후광이 있는지 플레이트를 검사한다.

결과 레시티나제 검사의 해석

결과 레시티나제 시험의 해석

양성 레시티나제 시험:콜로니를 둘러싼 매질로 확장되는 흰색의 불투명 한 확산 영역의 출현.

음성 레시티나제 시험:콜로니의 가장자리로부터 연장되는 백색 불투명 영역의 부재.

레시티나제 검사의 한계

  • 혐기성 상태의 유지는 의무적입니다.
  • 음성 레시티나제 검사는 레시티나제가 한천 판 전체에 확산되어 해석을 어렵게 만들 수 있으므로 접종되지 않은 대조판과 비교해야합니다.
  • 퍼프린엔젠 유형 항독소는 씨.퍼프린젠스에 특이적이지 않다;양성 나글러 반응은 또한 씨.비페르멘탄,씨.소르델리,및 씨. baratti if heavy inoculum are used.

Quality Control of Lecithinase Test

Clostridium perfringens, ATCC13124: lecithinase positive

Clostridium sporogenes, ATCC11437: lecithinase negative

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